發布日期:2022-02-25 來源:GM
1.服務介紹
腺病毒感染范圍廣,幾乎可以感染所有細胞系、原代細胞和部分組織。感染效率高達100%,可全面超越其它病毒載體工具和脂質體轉染。 腺病毒(Ad)是一種無包膜的線狀雙鏈DNA病毒,其復制不依賴于宿主細胞的分離。有近50個血清型,大多數Ad載體都是基于血清型2和5,通過轉基因的方式取代E1和E3基因,降低病毒的復制能力。這些重組病毒僅在高水平表達E1和E3基因的細胞中復制,因此是一種適用于治療的高??刂葡到y。
2. 實驗結果展示
293細胞腺病毒P2代 白光視野(200x)
293細胞腺病毒P2代 熒光視野(200x)
3.實驗流程
接種293細胞——培養12h,密度70%,病毒包裝——6h后換液——24h-48h后,鏡下觀察熒光,病毒收集,-80℃和37℃反復凍融3次——病毒感染293細胞,連續進行三代感染。
4.注意事項
⑴病毒收集時,注意個人防護,及實驗過程中用到培養瓶等消毒處理;
⑵病毒轉染后,可以通過顯微鏡下觀察熒光初步判斷病毒是否包裝成功;
⑶37℃融化時一旦病毒融化就馬上取出,長時間在37℃溫育會降低病毒滴度,完全融化后可以劇烈震蕩30s,凍融周期通常會持續2~4次才可以獲得高滴度的病毒。
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