發(fā)布日期:2022-02-16 來源:GM
1.服務(wù)介紹
細(xì)胞增殖檢測實(shí)驗(yàn)常用的是CCK-8 試劑盒,是一種基于 WST-8 而廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速、高靈敏度、無放射性的比色檢測試劑盒,對于同樣的細(xì)胞,顏色的深淺 (生成的 formazan 量) 和細(xì)胞數(shù)目呈線性關(guān)系。
2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示
3.實(shí)驗(yàn)流程
制備細(xì)胞懸液、接種細(xì)胞孵育12h——各時(shí)間點(diǎn)取出培養(yǎng)板,CCK8處理細(xì)胞——孵育2h后活性測定
4.注意事項(xiàng)
⑴CCK-8 的培養(yǎng)時(shí)間一般為 1-4 小時(shí),但在培養(yǎng) 30 分鐘左右即可取出肉眼觀察顯色程度,根據(jù)細(xì)胞種類而定,需要摸索條件,CCK-8 的*佳反應(yīng)時(shí)間以具體顯色的*佳時(shí)間為準(zhǔn);
⑵使用 96 孔板進(jìn)行檢測時(shí),如果細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長,一定要注意蒸發(fā)問題。一方面,由于 96 孔板周圍一圈*容易蒸發(fā),可以采取棄用周圍一圈的辦法,改加相同量的 PBS 、水或培養(yǎng)液;另一方面,可以把 96 孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方,以緩解蒸發(fā);
⑶本試劑盒的檢測依賴于脫氫酶催化的反應(yīng),所以還原劑 (例如一些抗氧化劑) 會干擾檢測,如果待檢測體系中存在較多的還原劑,需設(shè)法去除。用酶標(biāo)儀檢測前需確保每個(gè)孔內(nèi)沒有氣泡,否則會干擾測定;
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