發(fā)布日期:2022-02-17 來源:GM
1.服務(wù)介紹:
缺血再灌注是器官移植、休克、動脈搭橋后普遍存在的問題。腎臟是發(fā)生缺血*常見的器官之一,尤其是腎移植,不可避免的要經(jīng)歷不同程度的缺血,腎臟缺血再灌注是急性腎衰的常見原因。對麻醉動物的腎動脈進行阻斷和再通后,可引起腎臟缺血后再灌注損傷。在缺血再灌注過程中,鈣超載、線粒體能量合成障礙、氧的自由基增多等因素造成腎小管內(nèi)皮組織脫落,腎組織的結(jié)構(gòu)破壞進而使腎臟功能發(fā)生障礙。
2.實驗結(jié)果展示:
實驗過程:
正常對照H&E染色: 模型組H&E染色:
3.實驗流程:
動物麻醉后,腹部朝上擺放,用醫(yī)用膠布固定四肢,電動刮毛刀褪去腹部毛發(fā),70%酒精對腹部表皮進行消毒。從箭突末端沿腹中線向下剪開3cm切口,暴露腹腔。注意:切口不能超過箭突,該處皮膚與肌肉中匯集大量血管,破損會導(dǎo)致動物大量失血。用止血鉗分別夾住切口兩側(cè)和箭突并撥開,盡量暴露腹腔。Tips:可用紗布墊高止血鉗,以抬高腹壁,便于觀察。用生理鹽水濕潤紗布和棉簽。取兩塊濕潤的紗布置于切口右側(cè)(動物左側(cè))。用濕潤的棉簽非常輕柔地將小鼠的腸道從腹腔從推至旁邊的紗布上,使門靜脈充分地暴露。再取一塊濕潤的紗布覆蓋腸道,以防干燥。用剪刀仔細地剪開方肝葉與左肝葉之間的聯(lián)結(jié)組織,以更好地暴露**肝門(門靜脈,肝動脈,膽管)。必要時,需將中肝葉和左肝葉往膈膜方向鋪開,以方便觀察左肝葉與方肝葉的聯(lián)結(jié)。肝門中找到右肝葉分支,并在右肝葉分支上方用血管夾夾閉門靜脈,肝動脈和膽管。夾閉后,中肝葉和左肝葉(體積約占整個肝臟70%)的顏色會很快由赤褐色變成蒼白。若中肝葉和左肝葉顏色沒有發(fā)生明顯變化,則取下夾子重新夾閉。夾子放置的深度很重要。肝動脈的深度比門靜脈要深。成功完成血管夾放置后,用濕潤的棉簽輕輕的將腸道推回腹腔內(nèi),向腹腔內(nèi)滴加500μl 10U/ml肝素鈉生理鹽水溶液,用生理鹽水濕潤的紗布覆蓋切口。將動物轉(zhuǎn)移到加熱燈或加熱墊下,是動物體溫維持在37℃。在缺血過程中緊密看護動物,防止動物體溫下降,并確保覆蓋的紗布保濕濕潤。期間為防止動物蘇醒可向腹腔滴加少量麻醉劑(50μl)。實驗設(shè)定的缺血時間結(jié)束后,輕輕將血管夾取出,向腹腔內(nèi)滴加500μl生理鹽水,以補充手術(shù)過程中的體液損失。取出血管夾后,對切口進行雙層縫合。實驗設(shè)定的再灌注時間結(jié)束時處死動物采樣保存。
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