發(fā)布日期:2022-03-23 來源:admin
一些分子生物學(xué)進(jìn)展使得一些生物技術(shù)工具極大提高了生物發(fā)光和化學(xué)發(fā)光的檢測和快速應(yīng)用。這些發(fā)展方便了體外和體內(nèi)持續(xù)檢測生物過程(如基因表達(dá),蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互間作用和疾病的進(jìn)程),可應(yīng)用于臨床、診斷、和藥物開發(fā)等。而且,結(jié)合發(fā)光酶或某些在基因水平有生物特異結(jié)合位點的發(fā)光蛋白發(fā)展了超敏感和選擇性的生物分析工具,如重組細(xì)胞生物傳感器,免疫分析和核酸雜交系統(tǒng)。發(fā)光分析信號的高度可偵測性使得它非常適合于微小化的生物分析裝置(如微矩陣,微流設(shè)備和高密度的微孔板)以用于小量樣品體積的基因和蛋白的高通量篩選。
自從20多年前,Marlene DeLuca’s**個成功的獲得表達(dá)螢火蟲熒光素酶基因(luc基因)的轉(zhuǎn)基因煙草以來,生物發(fā)光的應(yīng)用進(jìn)入了一個新時代。生物發(fā)光和化學(xué)發(fā)光(BL/CL)的主要特點就在于發(fā)光信號的高度可測性,可以用PMT(光電倍增管)和CCD成像系統(tǒng)來檢測極少量的光子信號。BL是屬于CL范疇之內(nèi),CL反應(yīng)的特點是高光子產(chǎn)生效率,BL為05-0.8 ,CL為0.1-0.001。因此BL/CL的檢測極限可以達(dá)到10-18到10-21摩爾,這顯然要比其它的光學(xué)技術(shù)強的多。
BL/CL已經(jīng)發(fā)展出了很多具體的分析方法來診斷目前微摩爾或納摩爾級的生物樣本。通過BL/CL結(jié)合酶反應(yīng),如氧化酶、脫氫酶和激酶等,就可以達(dá)到如此的檢測靈敏度。然而,以發(fā)光技術(shù)為基礎(chǔ)的分析主要還僅僅停留在作為一個診斷工具。如果BL/CL的潛能能夠得到開發(fā),那么許多稀有的微量樣品也可以通過一個便宜、可靠甚至是點對點的方式進(jìn)行測量。
分子生物學(xué)和生物技術(shù)持續(xù)地進(jìn)展產(chǎn)生了一些新的BL/CL試劑,包括重組和突變酶及相關(guān)基因,可以作為報告劑或探針。這些工具的獲得,再加上新的CL高效底物,促進(jìn)了革新性的生物分析技術(shù)的出現(xiàn),用于許多靶標(biāo)的超敏感檢測。
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