發布日期:2022-03-23 來源:admin
一些分子生物學進展使得一些生物技術工具極大提高了生物發光和化學發光的檢測和快速應用。這些發展方便了體外和體內持續檢測生物過程(如基因表達,蛋白質-蛋白質相互間作用和疾病的進程),可應用于臨床、診斷、和藥物開發等。而且,結合發光酶或某些在基因水平有生物特異結合位點的發光蛋白發展了超敏感和選擇性的生物分析工具,如重組細胞生物傳感器,免疫分析和核酸雜交系統。發光分析信號的高度可偵測性使得它非常適合于微小化的生物分析裝置(如微矩陣,微流設備和高密度的微孔板)以用于小量樣品體積的基因和蛋白的高通量篩選。
自從20多年前,Marlene DeLuca’s**個成功的獲得表達螢火蟲熒光素酶基因(luc基因)的轉基因煙草以來,生物發光的應用進入了一個新時代。生物發光和化學發光(BL/CL)的主要特點就在于發光信號的高度可測性,可以用PMT(光電倍增管)和CCD成像系統來檢測極少量的光子信號。BL是屬于CL范疇之內,CL反應的特點是高光子產生效率,BL為05-0.8 ,CL為0.1-0.001。因此BL/CL的檢測極限可以達到10-18到10-21摩爾,這顯然要比其它的光學技術強的多。
BL/CL已經發展出了很多具體的分析方法來診斷目前微摩爾或納摩爾級的生物樣本。通過BL/CL結合酶反應,如氧化酶、脫氫酶和激酶等,就可以達到如此的檢測靈敏度。然而,以發光技術為基礎的分析主要還僅僅停留在作為一個診斷工具。如果BL/CL的潛能能夠得到開發,那么許多稀有的微量樣品也可以通過一個便宜、可靠甚至是點對點的方式進行測量。
分子生物學和生物技術持續地進展產生了一些新的BL/CL試劑,包括重組和突變酶及相關基因,可以作為報告劑或探針。這些工具的獲得,再加上新的CL高效底物,促進了革新性的生物分析技術的出現,用于許多靶標的超敏感檢測。
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