發(fā)布日期:2022-02-23 來源:GM
1.服務(wù)介紹:
特異鏈建庫是利用隨機(jī)引物合成RNA的一條cDNA鏈,在合成第二條鏈的時(shí)候用dμTP代替dTTP,加adaptor后用μDGase處理,將有μ的第二條cDNA降解掉。降解發(fā)生之后,雙鏈的文庫就只剩下了一條鏈(負(fù)鏈)。而這條鏈的兩頭是接的不同序列的接頭。通過PCR擴(kuò)增,*終只保留了**條cDNA(負(fù)鏈)上級測序。這樣*后的insert DNA fragment都是來自于**條cDNA(負(fù)鏈),也就是dμTP叫fr-firststrand的原因。在測序的過程中先測得正鏈reads,再測得負(fù)鏈reads。小RNA測序技術(shù)采用膠分離技術(shù),收集樣本中18-30nt的RNA片段,利用高通量測序技術(shù),一次性獲得單堿基分辨率的數(shù)百萬條小RNA序列信息,依托生物信息分析,鑒定已知小RNA,并預(yù)測新的小RNA及其靶基因。
2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示:
CircRNA /LncRNA/miRNA差異表達(dá)
3.實(shí)驗(yàn)流程:
總RNA——文庫構(gòu)建——測序——Raw reads——Clean reads——數(shù)據(jù)分析
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